齐口裂腹鱼PGC-1α超表达及干扰慢病毒载体构建
池永东，陈智慧，邱翔，钟红梅，陈官璐，林亚秋
西南民族大学 生命科学与技术学院，四川 成都 610041
Construction of an Over-Expression and Interference Lentivirus Vector of PGC-1α Gene in Prenant′s Schizothoracin Schizothorax prenanti
CHI Yongdong, CHEN Zhihui, QIU Xiang, ZHONG Hongmei, CHEN Guanlu, LIN Yaqiu
摘要 利用基因重组方法构建齐口裂腹鱼PGC-1α超表达和干扰慢病毒载体，为最终阐明PGC-1α调控齐口裂腹鱼肌纤维类型转化的分子机理提供重要基础。根据GenBank上登录的齐口裂腹鱼PGC-1α基因序列（GenBank登录号为JN195738）设计引物，经过PCR扩增、双酶切、连接来构建PGC-1α超表达和干扰的慢病毒核心质粒，然后将其与穿梭质粒及包装质粒共同转染293 T细胞包装成病毒颗粒，感染体外培养的C2C12成肌细胞，利用实时荧光定量PCR(qPCR)检测PGC-1α在被超表达和干扰表达慢病毒载体感染C2C12成肌细胞72 h后的表达水平，确定其超表达及干扰效果。重组质粒FUGW-PGC-1α-RFP及PsicoR-PGC-1α-GFP测序验证成功，包装后感染C2C12成肌细胞经qPCR检测后结果显示，超表达组PGC-1α基因表达水平极显著高于对照组（P <0.01），而转染shRNA1组及shRNA2组的PGC-1α基因表达水平极显著低于对照组（P <0.01），证明该基因被成功超表达和干扰。成功构建齐口裂腹鱼PGC-1α超表达及干扰慢病毒载体，为进一步研究该基因在成肌细胞分化中的作用提供重要的基础数据。
关键词 ：
齐口裂腹鱼 ,
成肌细胞 ,
PGC-1α 慢病毒 ,
载体构建
Key words ：
Schizothorax prenanti myoblast PGC-1α
lentivirus
vector construction
引用本文:
池永东，陈智慧，邱翔，钟红梅，陈官璐，林亚秋. 齐口裂腹鱼PGC-1α超表达及干扰慢病毒载体构建 [J]. 水产科学, 2018, 37(6): 781-786.
Expression and Interference Lentivirus Vector of PGC-1α Gene in Prenant′s Schizothoracin Schizothorax prenanti . Fisheries Science, 2018, 37(6): 781-786.
链接本文:
http://www.shchkx.com/CN/ 或 http://www.shchkx.com/CN/Y2018/V37/I6/781
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