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虎皮鱼热激蛋白PtHsp70基因序列与低温表达分析 |
刘丽丽,王晓雯,朱建亚,张蓉,朱华,田照辉 |
北京市水产科学研究所,渔业生物技术北京市重点实验室,北京 100068 |
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Sequence Cloning and Cold-induced Tissue-specific Expression Analysis of PtHsp70 in Tiger Barb Puntius tetrazona |
LIU Lili, WANG Xiaowen, ZHU Jianya, ZHANG Rong, ZHU Hua, TIAN Zhaohui |
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摘要 通过同源克隆和cDNA末端快速克隆技术扩增获得狭温热带鱼类虎皮鱼热激蛋白70(PtHsp70)基因的cDNA序列,BLAST比对分析基因序列同源性,预测其编码氨基酸序列和结构,实时荧光定量PCR技术分析虎皮鱼PtHsp70基因组织特异性表达谱和低温胁迫下PtHsp70基因的表达模式。研究结果表明,PtHsp70基因cDNA序列全长2317 bp,其中5′非编码区120 bp,3′非编码区266 bp,编码区1932 bp,对应的开放阅读框为121~2052 bp,预测编码643个氨基酸。PtHsp70基因mRNA在成年虎皮鱼不同组织中表达水平依次为肝脏>肌肉>鳃>脑,其中肝脏PtHsp70基因本底表达水平显著高于其他组织(P<0.01),表明其在肝脏中具有重要的生物学功能。而随温度降低,肝脏PtHsp70基因表达水平呈先降后升的趋势,表明肝脏PtHsp70基因参与虎皮鱼应对低温胁迫的过程;随温度降低,虎皮鱼脑、鳃和肌肉组织PtHsp70基因mRNA水平显著上调(P<0.01),说明低温胁迫诱导PtHsp70基因mRNA表达。本研究克隆并鉴定了PtHsp70基因序列和组织表达谱,分析了低温胁迫下PtHsp70基因表达模式,研究结果显示,狭温热带鱼类虎皮鱼的PtHsp70基因具有组织特异性和温度诱导型表达特征。研究发现,PtHsp70基因在响应低温胁迫过程中具有重要作用,具有作为虎皮鱼低温胁迫分子标志物的潜能。
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关键词 :
狭温热带鱼,
PtHsp70,
诱导型表达,
组织特异性表达,
低温胁迫
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Key words:
tropical stenothermal fish
PtHsp70
inducible expression
tissue-specific expression
cold stress
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引用本文: |
刘丽丽,王晓雯,朱建亚,张蓉,朱华,田照辉. 虎皮鱼热激蛋白PtHsp70基因序列与低温表达分析[J]. 水产科学, 2019, 38(6): 774-782.
LIU Lili, WANG Xiaowen, ZHU Jianya, ZHANG Rong, ZHU Hua, TIAN Zhaohui. Sequence Cloning and Cold-induced Tissue-specific Expression Analysis of PtHsp70 in Tiger Barb Puntius tetrazona. Fisheries Science, 2019, 38(6): 774-782.
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链接本文: |
http://www.shchkx.com/CN/ 或 http://www.shchkx.com/CN/Y2019/V38/I6/774 |
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