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| 仿刺参补体AjC3部分基因的原核表达及多克隆抗体的制备 |
| 张思,李明,张建清,卢亚楠,翟钰,张峰 |
| 大连海洋大学 水产与生命学院,辽宁 大连,116023 |
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| Prokaryotic Expression of Gene Fragments of AjC3 and Preparation of Polyclonal Antibody in Sea Cucumber Apostichopus japonicus |
| ZHANG Si,LI Ming,ZHANG Jianqing,LU Yanan,ZHAI Yu,ZHNAG Feng |
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摘要 通过制备仿刺参补体C3(AjC3)多克隆抗体,为进一步研究仿刺参补体AjC3免疫机制奠定基础.利用PCR技术扩增AjC3部分基因片段(4556~5110 bp),将该片段与原核表达载体pGS-21a连接.将重组表达质粒转化到Transetta(DE3)中经IPTG诱导表达.表达的重组蛋白经镍柱纯化后,作为抗原免疫小鼠制备AjC3多克隆抗体.分别用间接ELISA,Western blot检测抗体的效价和特异性.结果显示,PCR扩增得到约555 bp的目的片段,重组蛋白分子量大小约56 ku;间接ELISA检测抗体效价达1:25600,Western blot结果显示,多克隆抗体具有良好的特异性.该试验成功的制备了补体AjC3多克隆抗体,为补体AjC3的进一步研究提供了检测工具.
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收稿日期: 2017-01-25
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| 引用本文: |
张思,李明,张建清,卢亚楠,翟钰,张峰. 仿刺参补体AjC3部分基因的原核表达及多克隆抗体的制备[J]. 水产科学, 2017, 36(1): 94-98.
ZHANG Si,LI Ming,ZHANG Jianqing,LU Yanan,ZHAI Yu,ZHNAG Feng. Prokaryotic Expression of Gene Fragments of AjC3 and Preparation of Polyclonal Antibody in Sea Cucumber Apostichopus japonicus. Fisheries Science, 2017, 36(1): 94-98.
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| 链接本文: |
| https://www.shchkx.com/CN/ 或 https://www.shchkx.com/CN/Y2017/V36/I1/94 |
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