|
|
|
| N-端缺失突变核糖核酸酶抑制因子在毕赤酵母中的克隆与表达 |
| 吴毓,王继红,吴妍宁,崔秀云,赵宝昌 |
| 辽宁师范大学,生命科学学院,辽宁,大连,116029,大连医科大学,生物化学与分子生物学教研室,辽宁,大连,116027 |
|
| Cloning and Expressing of Deletion-Mutagenesis Ribonuclease Inhibitor in Pichia pastoris |
|
|
|
摘要 人胎盘核糖核酸酶抑制因子(HRI)是一种存在于细胞浆中的50kDa的酸性蛋白质,富含亮氨酸和半胱氨酸.作为胞浆蛋白可保护细胞不受外来的胰RNase的侵袭,同时做为RNase抑制剂在各实验室广为应用.HRI主要结构是由7个富含亮氨酸的重复序列组成,7个亮氨酸重复单位有规律环状排列使N-末端、C-末端在空间上较为接近.本文用PCR的方法在HRI cDNA 5'端去除30个碱基,并将此缺失突变的HRI的cDNA片段构建于质粒pPIC9K,PCR和双酶切鉴定结果为阳性,测序结果证实在HRI cDNA 5'端成功引入30个碱基的缺失突变.电击转化入毕赤酵母(Pichia pastores)GS115中,进行分泌型表达.对表达产物进行亲和层析纯化.经SDS-PAGE和Western-blot免疫印迹杂交,证实表达产物为N-端缺失突变的核糖核酸酶抑制因子.
|
|
|
收稿日期: 2004-09-25
|
| [1] |
沈兆媛，鲁建飞，许丹，吕利群. 中草药饲料添加剂对异育银鲫感染Ⅱ型鲤疱疹病毒的影响[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 289-294. |
| [2] |
陈仲，蒋经伟，高杉，孙红娟，董颖，周遵春. 不同病原菌刺激后仿刺参幼参体腔细胞中免疫相关酶的应答变化[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 295-300. |
| [3] |
裴鹏兵，吴洁琼，梁宏豪，杜虹. 生物净水栅对凡纳滨对虾肠道菌群组成的影响[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 301-308. |
| [4] |
王晓光，王兴兵，寇凌霄，石俊艳，肖祖国，魏宏祥，刘勇，李军，骆小年. 北方须鳅的耗氧节律、耗氧率和窒息点的研究[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 309-315. |
| [5] |
马小康，吴小嫚，胡乐琴. 2种活菌饲料对金鲫幼鱼肠道及水体微生态的影响[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 316-323. |
| [6] |
程逍妹，陈子廷，颜志波，赵培雅，王方海，李广宏. 蝇蛆蛋白对凡纳滨对虾生长、免疫及肌肉成分的影响[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 324-329. |
| [7] |
张清雯，陈超，陈建国，刘玲，赵亭亭，张庆文. 镧对条纹锯鮨组织抗氧化酶及Na+/K+-ATP酶活性的影响[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 330-335. |
| [8] |
江飚，王晶，罗恒利，陈佳，李国清，李安兴. 福尔马林对防治大黄鱼刺激隐核虫病的研究[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 336-341. |
| [9] |
周胜杰，胡静，马振华，陈旭，杨其彬，杨蕊，刘亚娟，孟祥君. 尖吻鲈尾部骨骼胚后发育研究[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 342-347. |
| [10] |
陈璇，张飞飞，陈志永，隗黎丽，范玉顶，张家奇，徐敏，汤百福，刘彧，钟其旺. 不同测定方法对聚维酮碘杀菌效果的比较研究[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 348-353. |
| [11] |
唐笑，黄凯，杨淇龄，罗志远，武林华，左腾. 高效液相色谱法检测罗非鱼血浆中L-肉碱的方法研究[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 354-360. |
| [12] |
杨俊丽，吴雪，李希磊，崔龙波. 莱州湾扇贝养殖区表层沉积物质量评价[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 361-367. |
| [13] |
韩耀全，何安尤，蓝家湖，吴伟军，李育森，王大鹏，雷建军，施军. 乌原鲤的胚胎发育特征[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 368-373. |
| [14] |
罗志远，周宇，杨淇龄，黄凯，唐笑，武林华. L-肉碱在罗非鱼体内的药代动力学[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 374-378. |
| [15] |
陈明强，陈旭，李有宁，吴洽儿，于刚，马振华，邢孔武，王理. 美济礁合浦珠母贝吊笼养殖试验[J]. 水产科学, 2018, 37(3): 379-383. |
|
|
|
|
