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鲶生长激素基因cDNA的克隆和原核表达 |
杜启艳,陈丽丽,南平,常重杰 |
河南师范大学,生命科学学院,河南,新乡,453007 |
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Molecular Cloning and Prokaryotic Expression of Growth Hormone in Silurus asotus |
DU Qiyan,CHEN Li-li,NAN Ping,CHANG Zhong-jie |
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摘要 从脑垂体中提取总RNA,用RT-PCR扩增并克隆到鲶鱼的生长激素(GH)基因cDNA.分析其核苷酸序列和推测的氨基酸序列,结果显示:鲶鱼生长激素基因的开放阅读框(ORF)包括603个核苷酸;编码200个氨基酸;其中包括22个氨基酸的信号肽和178个氨基酸的成熟肽.把GH成熟肽的cDNA克隆入表达载体pET-28a,用IPTG诱导重组蛋白的表达,其表达量超过细胞蛋白总量的50%,主要为不溶性的包含体.细菌裂解液沉淀溶于8 mol/L尿素后,用固定化金属配体亲和层析纯化,获得分子量为22.5 kD的单一蛋白带.
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收稿日期: 2007-04-25
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引用本文: |
杜启艳,陈丽丽,南平,常重杰. 鲶生长激素基因cDNA的克隆和原核表达[J]. 水产科学, 2007, 26(4): 195-199.
DU Qiyan,CHEN Li-li,NAN Ping,CHANG Zhong-jie. Molecular Cloning and Prokaryotic Expression of Growth Hormone in Silurus asotus. Fisheries Science, 2007, 26(4): 195-199.
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链接本文: |
http://www.shchkx.com/CN/ 或 http://www.shchkx.com/CN/Y2007/V26/I4/195 |
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