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| 黄鳝肝脏碱性磷酸酶的分离纯化及部分动力学性质研究 |
| 黄毅 |
| 西南科技大学,生命科学与工程学院,四川,绵阳,621010 |
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| Isolation,Purification and Dynamics of Hepatic Alkaline Phosphatase in Ricefield Eel Monopterus albus |
| HUANG Yi |
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摘要 经Tris-HCl缓冲液(pH 8.6)抽提,正丁醇脱脂、硫酸铵分级沉淀分离,DEAE-琼脂糖离子交换柱和Sephacryl S-200分子筛纯化,从黄鳝肝脏组织中获得单一电泳纯碱性磷酸酶制剂.该酶提纯倍数为123.12倍,比活力2957.34 U/mg.酶学性质和动力学性质研究表明,该酶在260 nm处有一特征吸收峰,等电点为5.21;该酶催化磷酸苯二钠水解反应,初速度为6.02 μmol/(L·min),米氏常数为1.17 mmol/L,最大反应速度为13.75 μmol/(L·min),反应活化能为52.6 kJ·mol;最适pH为10.4,pH＞11不稳定;最适温度为40℃,温度高于50℃不稳定.
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收稿日期: 2009-06-25
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