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拟穴青蟹ISSR-PCR条件的优化 |
蔡小辉,彭银辉,彭重威,周文红,赖成民乐,宋忠魁 |
广西海洋研究所,广西海洋生物技术重点实验室,广西,北海,536000,钦州学院,北部湾海洋保护与开发利用实验室,化学与生物系,广西,钦州,535000 |
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Optimization of Experiment Conditions with ISSR-PCR for Mud Crab Scylla paramamosain |
CAI Xiao-hui,PENG Yin-hui,PENG Chong-wei,ZHOU Wen-hong,LAICHENG Min-le,SONG Zhong-kui |
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摘要 分析DNA模板、Mg2+、dNTPs、引物和Taq DNA聚合酶及甲酰胺、二甲基亚砜等对拟穴青蟹ISSR-PCR反应的影响.研究结果确定了获得清晰条带的模板DNA、Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶的浓度范围分别为:模板DNA 8~50 ng/μl ,Taq DNA聚合酶0.75~1.0 U, Mg2+1.0~2.0 mmol/L(与引物密切相关),dNTP 0.15~0.20 mmol/L,引物浓度0.6~0.8 μmol/L.甲酰胺的添加并不能优化拟穴青蟹ISSR-PCR反应结果,而低浓度的二甲基亚砜可提高扩增产物的清晰度,但与引物相关.
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收稿日期: 2010-05-25
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引用本文: |
蔡小辉,彭银辉,彭重威,周文红,赖成民乐,宋忠魁. 拟穴青蟹ISSR-PCR条件的优化[J]. , 2010, 29(5): 282-286.
CAI Xiao-hui,PENG Yin-hui,PENG Chong-wei,ZHOU Wen-hong,LAICHENG Min-le,SONG Zhong-kui. Optimization of Experiment Conditions with ISSR-PCR for Mud Crab Scylla paramamosain. , 2010, 29(5): 282-286.
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链接本文: |
http://www.shchkx.com/CN/ 或 http://www.shchkx.com/CN/Y2010/V29/I5/282 |
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