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| 青蟹微卫星DNA的筛选及特征分析 |
| 周宇芳,舒妙安,朱晓宇 |
| 浙江大学,动物科学学院,浙江,杭州,310029 |
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| Screening and Characterization of Microsatellite DNA in Mud Crab Scylla paramamosain |
| ZHOU Yu-fang,SHU Miao-an,ZHU Xiao-yu |
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摘要 利用磁珠富集法,结合生物素标记的(CA)16寡核苷酸探针从青蟹基因组MboI酶切片段中筛选微卫星DNA序列.将得到的片段与pGEM-T Easy载体连接后转化克隆构建微卫星富集文库.经PCR筛选检测,对89个阳性克隆进行测序,其中52个克隆中含有64个微卫星,完全型占87.50%,重复次数超过11次的占78.12%.根据所获微卫星的侧翼序列设计并合成了30对引物,通过优化PCR反应条件,并在35只青蟹个体中进行PCR扩增检测,最终获得了10对具有多态性的引物,为进一步开展青蟹遗传多样性分析、遗传图谱构建等研究提供了基础资料.
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收稿日期: 2010-10-25
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