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传染性造血器官坏死病毒G蛋白的原核表达及纯化 |
郑怀东,刘学光,杜杨,李强,郭欣硕,王秋雨 |
辽宁省水产品质量安全检验检测局,辽宁沈阳,110031,辽宁省轻工产品质量检测院,辽宁沈阳,110032,辽宁大学生命科学院,辽宁沈阳,110036 |
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Prokaryotic Expression and Purification of G Protein in Infectious Hematopoietic Necrosis Virus |
ZHENG Huai-dong,LIU Xue-guang,DU Yang,LI Qiang,GUO Xin-shuo,WANG Qiu-yu |
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摘要 鱼类传染性造血器官坏死病毒外壳糖蛋白(G蛋白)是一种可以诱导产生病毒中和抗体和宿主保护性免疫反应的重要抗原.国内对该病毒的诊断方法还依赖实验室的操作条件,不适用于病毒爆发现场的快速诊断.而建立胶体金试纸条法则可以满足上述需要.此法应用双抗体夹心原理,所以获取高质量IHNV-G蛋白作为抗原是试纸条成功的保证.通过合成得到该蛋白基因的全长序列,将其插入到表达载体pET-30a中,构建重组表达质粒pET-30a-IHNV-G.,并转化至大肠杆菌BL21(DE3)plySs中.在IPTG浓度为1 mmol/L时,37℃诱导表达4h时目的蛋白表达量最大,得到预期分子质量约为57 ku的目的蛋白,表达量为29%.Western Blot分析结果证实该蛋白在宿主菌中成功表达.
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收稿日期: 2013-04-25
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引用本文: |
郑怀东,刘学光,杜杨,李强,郭欣硕,王秋雨. 传染性造血器官坏死病毒G蛋白的原核表达及纯化[J]. , 2013, 32(4): 232-235.
ZHENG Huai-dong,LIU Xue-guang,DU Yang,LI Qiang,GUO Xin-shuo,WANG Qiu-yu. Prokaryotic Expression and Purification of G Protein in Infectious Hematopoietic Necrosis Virus. , 2013, 32(4): 232-235.
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链接本文: |
http://www.shchkx.com/CN/ 或 http://www.shchkx.com/CN/Y2013/V32/I4/232 |
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