香鱼肝胰腺cDNA文库的构建和鉴定
张亮,史雨红,陈炯,陆新江,李明云
宁波大学应用海洋生物技术教育部重点实验室,浙江,宁波,315211
Construction and Characterization of a cDNA Library in Hepatopancreas of Ayu Plecoglossus altivelis
ZHANG Liang,SHI Yu-hong,CHEN Jiong,LU Xin-jiang,LI Ming-yun
摘要 以香鱼正常肝胰腺为材料,构建cDNA文库.初始文库库容大于1.3×107 cfu/ml,扩增文库的滴度大于1.1×106cfu/ml,平均插入片段约为1.0 kb.从文库中随机挑选297个cDNA克隆测序,得到232个功能已知EST序列,功能包括代谢、蛋白质合成、细胞与机体防御、信号转导以及细胞结构与运动等5个方面.随机测序获得香鱼弹性蛋白酶(Elastase,ELA)编码序列,cDNA序列全长957个核苷酸,3'-末端具有polyA尾,编码一个由268个氨基酸组成28.7 ku大小蛋白.序列分析表明,香鱼ELA的N端15个氨基酸为信号肽,成熟肽具有丝氨酸蛋白酶家族的典型结构特征.香鱼ELA与斜带石斑鱼、大西洋鳕和金头鲷的ELA氨基酸序列同源性最高,达76%～77%.系统进化树分析表明,香鱼ELA与其他鱼类ELA紧密成簇.RT-PCR检测显示,香鱼ELA基因mRNA在香鱼肝胰腺、脾、肠组织中均大量表达.
收稿日期: 2011-01-25
引用本文:
张亮,史雨红,陈炯,陆新江,李明云. 香鱼肝胰腺cDNA文库的构建和鉴定[J]. 水产科学, 2011, 30(1): 11-16.
链接本文:
http://www.shchkx.com/CN/ 或 http://www.shchkx.com/CN/Y2011/V30/I1/11
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