斑马鱼原肌球蛋白基因克隆表达及免疫学鉴定
李荔,陈樱麟,闫浩,刘志刚
深圳大学过敏反应与免疫学研究所,广东深圳,518060
Cloning and Expression of Tropomyosin Gene and Identification of Allergic Activity in Zebra Fish (Danio rerio)
LI Li,CHEN Ying-lin,YAN Hao,LIU Zhi-gang
摘要 克隆斑马鱼原肌球蛋白的基因并表达纯化出重组蛋白,对其免疫学特性进行鉴定.提取斑马鱼总RNA,采用RT-PCR克隆斑马鱼原肌球蛋白的全长基因,根据序列设计带有酶切位点的特异性引物,扩增斑马鱼原肌球蛋白基因的完整开放阅读框,连入载体pET-28a,在大肠杆菌BL21 (DE3)菌株中通过IPTG诱导得到重组斑马鱼原肌球蛋白.重组蛋白经Ni2+亲和层析柱纯化后进行Western-blot检测.获得斑马鱼原肌球蛋白基因,Western-blot结果显示重组蛋白具有良好的免疫活性.本研究成功克隆并表达了斑马鱼原肌球蛋白基因,经免疫学鉴定发现其具有过敏原性.
收稿日期: 2013-01-25
引用本文:
李荔,陈樱麟,闫浩,刘志刚. 斑马鱼原肌球蛋白基因克隆表达及免疫学鉴定[J]. 水产科学, 2013, 32(1): 26-30.
链接本文:
http://www.shchkx.com/CN/ 或 http://www.shchkx.com/CN/Y2013/V32/I1/26
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