鲤春病毒血症病毒焦磷酸测序检测技术的建立
刘瑶,尹伟力,张四化,岳志芹,孙涛
荣成出入境检验检疫局,山东 荣成 264300;烟台出入境检验检疫局检验检疫中心,山东 烟台 264000;武汉市动物疫病防控中心,湖北 武汉 430003;山东出入境检验检疫局技术中心,山东 青岛 266002
Development of Pyrosequencing Method for Detecting Spring Viremia of Carp Virus
LIU Yao, YIN Weili, ZHANG Sihua, YUE Zhiqin, SUN Tao
摘要 通过收集鲤春病毒血症病毒基因序列,设计了鲤春病毒血症病毒最为保守的指纹序列,以及测序引物,建立了鲤春病毒血症病毒焦磷酸测序检测方法。对所构建的鲤春病毒血症病毒焦磷酸检测方法进行特异性试验和灵敏度检测,试验结果表明所建立的方法特异性好,在8种鱼类病毒中能够特异性检测出目的病毒,检测方法灵敏度高,最低检出核酸量为10 pg/μL。对建立的焦磷酸测序检测方法进行了实际应用研究,选取国内采集与进口的鱼类样本共计80批次进行鲤春病毒血症病毒检测。结果显示,焦磷酸测序检测方法可以有效的检出常规RT-PCR不能检出的假阴性样本和弱阳性样本,该方法的灵敏度和特异性可以满足水生动物疫病检测的需要。
关键词 :
鲤春病毒血症病毒 ,
焦磷酸测序 ,
检测
Key words :
spring viremia of carp virus(SVCV)
pyrosequencing
detection
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