鲤春病毒血症病毒焦磷酸测序检测技术的建立
刘瑶,尹伟力,张四化,岳志芹,孙涛
荣成出入境检验检疫局,山东 荣成 264300;烟台出入境检验检疫局检验检疫中心,山东 烟台 264000;武汉市动物疫病防控中心,湖北 武汉 430003;山东出入境检验检疫局技术中心,山东 青岛 266002
Development of Pyrosequencing Method for Detecting Spring Viremia of Carp Virus
LIU Yao, YIN Weili, ZHANG Sihua, YUE Zhiqin, SUN Tao
摘要 通过收集鲤春病毒血症病毒基因序列,设计了鲤春病毒血症病毒最为保守的指纹序列,以及测序引物,建立了鲤春病毒血症病毒焦磷酸测序检测方法。对所构建的鲤春病毒血症病毒焦磷酸检测方法进行特异性试验和灵敏度检测,试验结果表明所建立的方法特异性好,在8种鱼类病毒中能够特异性检测出目的病毒,检测方法灵敏度高,最低检出核酸量为10 pg/μL。对建立的焦磷酸测序检测方法进行了实际应用研究,选取国内采集与进口的鱼类样本共计80批次进行鲤春病毒血症病毒检测。结果显示,焦磷酸测序检测方法可以有效的检出常规RT-PCR不能检出的假阴性样本和弱阳性样本,该方法的灵敏度和特异性可以满足水生动物疫病检测的需要。
关键词 :
鲤春病毒血症病毒 ,
焦磷酸测序 ,
检测
Key words :
spring viremia of carp virus(SVCV)
pyrosequencing
detection
[1]
尹伟力,耿金培,刘宁,岳志芹,郑小龙,刘荭,许红岩. 液相芯片技术同时检测真鲷虹彩病毒和锦鲤疱疹病毒方法的建立 [J]. , 2014, (3): 157-162.
[2]
孙建华,孙振中,戚隽渊,刘琴,郭霞,黄雪玲. 大气压化学电离源的高效液相色谱串联质谱法同时测定黄鳝肌肉中九种性激素的残留研究 [J]. , 2014, (12): 831-834.
[3]
滕炜鸣,李文姬,张明,李石磊,刘项峰,付成东,刘忠颖. 虾夷扇贝脓胞病病原查氏弧菌的PCR快速检测 [J]. , 2014, (10): 649-653.
[4]
于力,史秀杰,郑晓聪,何俊强,贾鹏,兰文升,王津津,刘荭. 鲑鱼甲病毒病研究进展 [J]. , 2014, (10): 662-666.
[5]
尹伟力,张四化,岳志芹,郑小龙,刘荭. 液相芯片技术同时检测对虾桃拉病毒和虾黄头病毒的研究 [J]. , 2014, (1): 46-51.
[6]
刁菁,杨秀生,叶海斌,于晓清,许拉,李天保,王勇强. 一种水产迟钝爱德华氏菌快速药敏检测方法的研究 [J]. , 2014, (1): 22-28.
[7]
张新辉,罗伟,高泽霞,杨坤,祝东梅,温久福,钱雪桥,王卫民. 团头鲂三倍体的诱导及其鉴定 [J]. , 2013, (9): 503-508.
[8]
王翔宇,吕芳,詹冬梅,李美真. 养殖海藻种质资源保存研究进展 [J]. , 2013, 32(6): 368-372.
[9]
吴晓春,邓灯,程顺峰,刘慧,姜令绪. 鱼肠道弧菌间接ELISA快速检测法的建立 [J]. , 2013, 32(5): 284-288.
[10]
王璐,梁利国,谢骏,徐跑,夏飞. 嗜水气单胞菌双重PCR检测方法的建立及应用 [J]. , 2013, 32(4): 219-223.
[11]
陶诗,何芳芳,刘雪珠,何建瑜,王健鑫. 海水养殖鱼类病原微生物研究进展 [J]. , 2013, 32(3): 175-182.
[12]
曹庆云,孙育平,邵光银. 高效液相色谱检测凡纳滨对虾血液中5-羟色胺的方法研究 [J]. , 2012, 31(5): 295-297.
[13]
朱晓平,骆剑,尹绍武,胡亚丽,胡静,祝斐,刘志亮,彭艳辉. 云斑尖塘鳢微卫星分子标记的筛选与检测 [J]. , 2012, 31(4): 225-231.
[14]
姚东瑞,朱明,陈丽,毕可然,史爱琴,张晓君. 基于toxR基因病原哈氏弧菌PCR检测方法的建立 [J]. , 2011, 30(9): 559-562.
[15]
刘文静,潘葳. 鳗鱼体内药物残留检测技术研究进展 [J]. , 2011, 30(9): 583-587.