尼罗罗非鱼MyD88基因的表达及多克隆抗体制备
张永德，林勇，潘传燕，冯鹏霏，陈晓汉，罗洪林
广西水产科学研究院，广西水产遗传育种与健康养殖重点实验室，广西 南宁 530021
Prokaryotic Expression and Polyclonal Antibody Preparation of MyD88 Gene in Nile Tilapia
ZHANG Yongde, LIN Yong, PAN Chuanyan, FENG Pengfei, CHEN Xiaohan, LUO Honglin
摘要 为体外表达尼罗罗非鱼髓样分化因子（MyD88）蛋白并制备抗该蛋白的多克隆抗体，采用无缝克隆技术将尼罗罗非鱼MyD88基因转入pET-B2m原核表达载体，并转入大肠杆菌B21中诱导表达，将表达的MyD88蛋白经纯化后免疫大耳兔制备多克隆抗体，采用Western blot和ELISA检测抗体的特异性和效价。试验结果表明，本研究成功构建了pET-B2m-MyD88原核表达载体，诱导表达获得了48.9 ku的重组蛋白，免疫大耳兔获得效价为1∶2 048 000的抗尼罗罗非鱼MyD88多克隆抗血清。Western blot检测结果显示，该抗体能够特异性的识别原核表达的MyD88蛋白。原核表达体系的建立及多克隆抗体的制备为进一步研究MyD88蛋白在尼罗罗非鱼先天性免疫中的功能奠定了基础。
关键词 ：
罗非鱼 ,
MyD88 原核表达 ,
多克隆抗体
Key words ：
tilapia MyD88
prokaryotic expression
polyclonal antibody
引用本文:
张永德，林勇，潘传燕，冯鹏霏，陈晓汉，罗洪林. 尼罗罗非鱼MyD88基因的表达及多克隆抗体制备 [J]. 水产科学, 2019, 38(5): 595-602.
链接本文:
http://www.shchkx.com/CN/ 或 http://www.shchkx.com/CN/Y2019/V38/I5/595
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