中华绒螯蟹细胞色素CYP2基因的克隆与表达分析
蒲红双，侯红漫，高祥刚，赫崇波，张公亮，许艺迪，鲍相渤，刘卫东
大连工业大学食品学院，辽宁 大连 116034； 辽宁省海洋水产科学研究院，辽宁省海洋 水产分子生物学重点实验室，辽宁 大连 116023
cDNA Cloning and Expression Analysis of CYP2 Gene in Chinese Mitten Crab Eriocheir sinensis
PU Hongshuang，HOU Hongman，GAO Xianggang，HE Chongbo，ZHANG Gongliang，XU Yidi，BAO Xiangbo，LIU Weidong
College of Food Science Engineering, Dalian Polytechnic University, Dalian 116034, China; Key Lab of Marine Fishery Molecular Biology of Liaoning Province, Liaoning Ocean and Fisheries Science Research Institute, Dalian 116023, China
摘要 为研究细胞色素CYP2基因在中华绒螯蟹蜕皮及生长发育中的作用，本试验通过逆转录聚合酶链式RT-PCR反应以及cDNA末端快速扩增RACE技术获得了中华绒螯蟹CYP2基因cDNA全长。用实时荧光定量PCR技术，分析该基因在中华绒螯蟹蜕皮过程中各组织的相对表达量。试验结果显示，中华绒螯蟹CYP2的 cDNA全长1772 bp，编码491个氨基酸序列，包括一个84 bp的5′端非编码区，一个212 bp的3′端非编码区、一个1475 bp的开放阅读框，经BLAST比对，该核苷酸序列与岸蟹、三疣梭子蟹的相似性分别为66%、64%。实时荧光定量PCR结果显示，中华绒螯蟹蜕皮前，CYP2基因在鳃中的表达量相对最高；在肝胰脏、肌肉中表达量略低于鳃；在Y器官、眼柄、胸神经节、脑神经节、肠中少量表达；在心和胃中表达量最低。中华绒螯蟹在不同的蜕皮时期中，通过荧光定量试验得出，肝胰脏中CYP2基因表达量在蜕皮前期和蜕皮期最高；眼柄中CYP2基因表达量从蜕皮期到蜕皮后期有上升趋势；鳃中CYP2基因表达量在蜕皮前期最高；Y器官、脑神经节和肠中CYP2基因表达量在蜕皮期最高；肌肉中CYP2基因表达量在蜕皮前期最高；胸神经节和胃中CYP2基因表达量在蜕皮后期最高；Y器官中CYP2基因在蜕皮前期表达量高于蜕皮后期和蜕皮期。以上试验结果表明，CYP2对中华绒螯蟹蜕皮生长中的调控可能起到重要作用。
关键词 ：
中华绒螯蟹 ,
CYP2 蜕皮 ,
基因克隆
Key words ：
Eriocheir sinensis CYP2 molting
gene cloning
引用本文:
蒲红双，侯红漫，高祥刚，赫崇波，张公亮，许艺迪，鲍相渤，刘卫东. 中华绒螯蟹细胞色素CYP2基因的克隆与表达分析 [J]. 水产科学, 2017, 36(2): 153-.
Chinese Mitten Crab Eriocheir sinensis . Fisheries Science, 2017, 36(2): 153-.
链接本文:
http://www.shchkx.com/CN/ 或 http://www.shchkx.com/CN/Y2017/V36/I2/153
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