中华绒螯蟹细胞色素CYP2基因的克隆与表达分析
蒲红双,侯红漫,高祥刚,赫崇波,张公亮,许艺迪,鲍相渤,刘卫东
大连工业大学食品学院,辽宁 大连 116034; 辽宁省海洋水产科学研究院,辽宁省海洋 水产分子生物学重点实验室,辽宁 大连 116023
cDNA Cloning and Expression Analysis of CYP2 Gene in Chinese Mitten Crab Eriocheir sinensis
PU Hongshuang,HOU Hongman,GAO Xianggang,HE Chongbo,ZHANG Gongliang,XU Yidi,BAO Xiangbo,LIU Weidong
College of Food Science Engineering, Dalian Polytechnic University, Dalian 116034, China; Key Lab of Marine Fishery Molecular Biology of Liaoning Province, Liaoning Ocean and Fisheries Science Research Institute, Dalian 116023, China
摘要 为研究细胞色素CYP2基因在中华绒螯蟹蜕皮及生长发育中的作用,本试验通过逆转录聚合酶链式RT-PCR反应以及cDNA末端快速扩增RACE技术获得了中华绒螯蟹CYP2基因cDNA全长。用实时荧光定量PCR技术,分析该基因在中华绒螯蟹蜕皮过程中各组织的相对表达量。试验结果显示,中华绒螯蟹CYP2的 cDNA全长1772 bp,编码491个氨基酸序列,包括一个84 bp的5′端非编码区,一个212 bp的3′端非编码区、一个1475 bp的开放阅读框,经BLAST比对,该核苷酸序列与岸蟹、三疣梭子蟹的相似性分别为66%、64%。实时荧光定量PCR结果显示,中华绒螯蟹蜕皮前,CYP2基因在鳃中的表达量相对最高;在肝胰脏、肌肉中表达量略低于鳃;在Y器官、眼柄、胸神经节、脑神经节、肠中少量表达;在心和胃中表达量最低。中华绒螯蟹在不同的蜕皮时期中,通过荧光定量试验得出,肝胰脏中CYP2基因表达量在蜕皮前期和蜕皮期最高;眼柄中CYP2基因表达量从蜕皮期到蜕皮后期有上升趋势;鳃中CYP2基因表达量在蜕皮前期最高;Y器官、脑神经节和肠中CYP2基因表达量在蜕皮期最高;肌肉中CYP2基因表达量在蜕皮前期最高;胸神经节和胃中CYP2基因表达量在蜕皮后期最高;Y器官中CYP2基因在蜕皮前期表达量高于蜕皮后期和蜕皮期。以上试验结果表明,CYP2对中华绒螯蟹蜕皮生长中的调控可能起到重要作用。
关键词 :
中华绒螯蟹 ,
CYP2 ,
蜕皮 ,
基因克隆
Key words :
Eriocheir sinensis
CYP2
molting
gene cloning
引用本文:
蒲红双,侯红漫,高祥刚,赫崇波,张公亮,许艺迪,鲍相渤,刘卫东. 中华绒螯蟹细胞色素CYP2基因的克隆与表达分析 [J]. 水产科学, 2017, 36(2): 153-.
PU Hongshuang,HOU Hongman,GAO Xianggang,HE Chongbo,ZHANG Gongliang,XU Yidi,BAO Xiangbo,LIU Weidong. cDNA Cloning and Expression Analysis of CYP2 Gene in Chinese Mitten Crab Eriocheir sinensis . 水产科学, 2017, 36(2): 153-.
链接本文:
http://www.shchkx.com/CN/ 或 http://www.shchkx.com/CN/Y2017/V36/I2/153
[1]
李豪,李鹏,严洁,解文利,周开亚. 中华绒螯蟹Timeless基因在不同发育阶段的表达谱分析 [J]. 水产科学, 2018, 37(2): 208-214.
[2]
葛永春,姜晓东,张金彪,吴旭干,邓登,成永旭. 3种投喂模式对中华绒螯蟹性腺发育和生化组成的影响 [J]. 水产科学, 2017, 36(5): 551-556.
[3]
曹振杰,付春鹏,周嗣泉,王茂剑,李娴,王慧. 中华绒螯蟹“蟹黄”与“蟹膏”的营养成分比较分析 [J]. 水产科学, 2017, 36(2): 178-.
[4]
宋德磊,李应东,曹延超,张洪艳,郭恩棉. 中华绒螯蟹神经系统及其胚后发育的组织学观察 [J]. 水产科学, 2017, 36(2): 183-.
[5]
李硕,白玉,薛蓓,娄海华,杨秀航,董逸,赖晓芳,阎斌伦,高焕. 脊尾白虾腺苷酸转移酶基因应答蜕皮的表达特征研究 [J]. 水产科学, 2017, 36(2): 224-.
[6]
胡清彪,李晓东,姜玉声,司永国,郑岩,孙娜. 不同家系中华绒螯蟹幼蟹在室外和室内的生长 [J]. , 2016, 35(5): 547-551.
[7]
石洪玥,刘阳,王晓梅,高金伟,邱琳珊,李晶晶. 七里海中华绒螯蟹遗传多样性的 RA PD 和 ISSR 分析 [J]. , 2016, 35(3): 255-260.
[8]
吴凡,赵燕静,管卫兵,蒋昕彧,周传江,孔祥会. 有机养殖模式下中华绒螯蟹抗氧化防护和溶菌酶的活性 [J]. , 2015, (7): 418-422.
[9]
蒲红双,高祥刚,侯红漫,赫崇波,张振宇,史井运. 甲壳动物蜕皮相关基因的研究进展 [J]. , 2015, (6): 391-398.
[10]
李思明,丁惠君,郭小泽,符辉,唐艳强,钟家友. 复方中草药对中华绒螯蟹生长、非特异性免疫和抗病力的影响 [J]. , 2015, (4): 201-207.
[11]
彭雪,黄晓亮,陈思涵,陈上静,应雪萍. 镉、汞单独及联合胁迫对中华绒螯蟹的急性毒性 [J]. , 2015, (4): 220-226.
[12]
王海候,沈明星,陆长婴,施林林,周新伟,金梅娟. 螺蛳替代商品饲料比例对中华绒螯蟹产量和水质的影响 [J]. , 2015, (11): 690-695.
[13]
许志强,葛家春,李跃华,朱清顺,潘建林. 中华绒螯蟹一个种质鉴定相关RAPD标记的SCAR转化 [J]. , 2012, 31(7): 429-432.
[14]
熊青海,陈婷,郭建英,黄成. 3种生境下克氏原螯虾与中华绒螯蟹竞争的研究 [J]. , 2012, 31(3): 147-151.
[15]
赵艳红,刘胥,祁峰,雷衍之,李永函. 对中华绒螯蟹生态育苗池中桡足类控制的初步研究 [J]. , 2012, 31(3): 165-168.